【新闻】中药黄精组织培养技术及种苗扩繁技术广叶橐吾
黄精、滇黄精和多花黄精,因为种植周期比较长、种子收集难度大、种子发芽率低、育苗周期长等原因,导致黄精种子繁殖后代性状分化严重,非常不利于黄精生长,因此为了使其保持性状一致,经过采用组织培养研究,对其进行了种苗扩繁,具体如下。
一、材料选择及消毒
1、材料选择:滇黄精组织培养外植体要选择当年生、生长健壮、无病虫害的植株,以其根茎为繁殖材料。
2、消毒:将所选择材料的地下块茎用清水冲洗干净,去掉叶片和根系,切取顶芽2-3cm,之后用200mg/L羧苄西林钠或头孢唑林钠浸泡5小时,取出材料后用无菌水清洗两次,接着再用75%乙醇漂洗30s,用无菌水清洗一次,用1g/L氧化汞灭菌5分钟,然后用无菌水清洗三次。晾干后切成0.5cm大小,然后接种子培养基上。
二、愈伤组织培养和芽分化
将无菌外植体经切分处理后接入MS+NAA 1.5mg/L+KT l.5mg/L培养基中15天后将有启动痕迹;培育大约25天,根茎芽周围开始冒出新芽;培育大约35天,根茎芽周围有大量新芽冒出,而且生长趋势有所增强;培育大约45天,新生芽的数量达到最大值,生长趋势达到最强;培育大约55天,新生芽的生长趋势开始明显下降,芽体有变黄迹象;培育大约65天,新生芽体生长趋势进一步下降,芽体有萎蔫现象,甚至会出现新生芽体枯死衰退情况。
三、滇黄精的继代增殖培养
等愈伤组织或不定芽形成后,要将分化的不定芽块茎切成0.5cm小块转接至增殖培养基(MS+6-BA 4.0rng /L+NAA0.2rng/L)。继代培养的培养时间为45-55天。
四、滇黄精的生根苗培养
将继代增殖培养的组培材料转移至生根培养基(1/2MS+ NAA1.0mg/L+活性炭0.20g/L)中进行增殖培养,大约30天后就能长出新根,生根率高达90%以上。
五、炼苗栘栽
黄精生根45天后,要敞开培养瓶炼苗3天,选择根长2-3cm、根数多于3条的芽的植株,洗净培养基后移栽于基质(泥炭土:沙:珍珠岩=2:2:1)中,放到温度处于18-20度的环境下,要求土壤湿度在50-60%,一般7-14天喷施一次叶面肥,大约60天后滇黄精组培苗成活率可达90%以上。
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